本发明公开了一种抗菌肽纳米软膏及其制备方法和用途，所述软膏主要成分为抗菌肽纳米复合物、硬脂醇、白凡士林、丙二醇和十二烷基硫酸钠；由抗菌肽外接于磷脂聚合物纳米颗粒后与硬脂醇、白凡士林、丙二醇和十二烷基硫酸钠混合而成。本发明中将磷脂聚合物纳米颗粒连接抗菌肽后，可保留抗菌肽的一部分抗菌活性，抑制和杀灭一些革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。本发明中的软膏可用于金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌感染引起的皮肤性疾病，且纳米载药乳膏生物相溶性及稳定性较好，局部用药后滞留时间长，对药物释放具有缓释及控释作用，为研究新型抗菌药物提供了新的研究领域，并对提高人类和畜产品安全性具有重要理论和实践意义。

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