本发明涉及生物技术领域，具体涉及靶向敲除ATG5基因的gRNA引物、表达系统、细胞株。本发明确定靶向ATG5基因的gRNA引物，第一靶点序列T1序列为AGTGGATAATCTTTATGGCATGG；第二靶点序列T2序列为TCATGACAACATGCTGACAGTGG。本发明构建的ATG5基因敲除的人血管内皮细胞株的总蛋白，检测自噬效应蛋白LC3‑Ⅰ/LC3‑Ⅱ、p62和Beclin‑1，结果显示自噬效应蛋白的表达增强，表明本发明构建的细胞株成功敲除ATG5基因，沉默ATG5基因的表达，能够应用于ATG5基因在引起内皮细胞向间充质的转化和凋亡的作用机制。

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