本发明公开了一种树状分子吉西他滨自组装纳米前药及其制备方法及其应用，首先使用不同的疏水端或亲水端合成末端叠氮修饰的两亲性树状分子，同时制备含炔键的吉西他滨前药分子，前两步的产物通过“叠氮‑炔”点击反应连接得到两亲性树状分子吉西他滨前药，最后通过透析自组装法制得纳米前药颗粒。对该纳米粒的微观结构及酶稳定性进行了研究，进一步通过细胞摄取和小鼠体内实验，证实该自组装纳米前药可明显提高原型药物吉西他滨的代谢稳定性及抗肿瘤活性，且能避免母体小分子药物吉西他滨存在的毒副作用大等问题，可为临床应用提供基础实验依据。

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