本发明属于细胞生物学领域，具体涉及一种人脐带血间充质干细胞的培养方法。包括以下步骤：将脐带血单个核细胞用第一培养基培养至细胞生长状态稳定，后续改用第二培养基进行培养，所述第一培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素和间充质干细胞生长添加物组成，其中胎牛血清体积占比为8‑12％，间充质干细胞生长添加物体积占比为0.1‑0.2％；所述第二培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素组成，其中胎牛血清体积占比为8‑12％；所述基础培养基为DMEM/F12培养基。本发明的人脐带血间充质干细胞的培养方法，步骤简单、经济成本较低、培养成功率高，适于获取大量的间充质干细胞以满足相关疾病治疗时的使用量较大的需求。

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