本发明公开了一种基于香豆酰肼的硫醇荧光探针的制备方法及应用，以香豆酰肼和对叔丁基苯酚二醛为原料合成了一种双席夫碱香豆素类衍生物(化合物Ⅰ)，化合物Ⅰ本身具有较强的荧光，在与铜离子配位后制成了香豆素－铜离子(Ⅱ)配合物,即为硫醇荧光探针Ⅰ‑Cu(Ⅱ)。该探针由于Cu2+的顺磁性及光诱导电子转移作用的影响，使化合物Ⅰ的荧光淬灭。而巯基氨基酸及其衍生物如谷胱甘肽等化合物中的硫原子与Cu2+具有更强的配位作用，这种竞争配位作用导致香豆素－铜离子(Ⅱ)配合物中的铜离子被巯基氨基酸及其衍生物夺走，重新生成化合物Ⅰ，从而恢复化合物Ⅰ的荧光。基于此本发明建立了一种快速、简便的检测硫醇化合物的方法。

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